Primo rapporto di Colletotrichum coccodes causando punti neri sulle patate a Mauritius

Punto nero (Colletotrichum coccodes) è diventata una malattia dei tuberi di patata economicamente significativa a causa della sua capacità di causare la morte precoce del fogliame. La malattia denominata punto nero è legata ai numerosi microsclerozi neri che il fungo può produrre sul suo ospite. Nell'agosto-settembre 2022, sono stati osservati sintomi del punto nero su c. 48% degli steli di patate (appena sopra il livello del suolo), c. 27% degli stoloni e c. 22% della superficie cutanea dei tuberi raccolti in campo aperto [Goodlands (20°04'13.1“S 57°39'37.0”E), Réduit (20°14'00.5“S 57°29'28.5”E) e Plaine Sophie (20°22'23.0“S 57°29'08.4”E)] a Mauritius.

Quindici tessuti di patata malata sono stati tagliati ciascuno in otto piccoli pezzi utilizzando un perforatore di sughero sterilizzato alla fiamma, che sono stati poi disinfettati in superficie con candeggina al 10% per due minuti, seguiti da risciacquo con acqua distillata sterile tre volte e infine placcati su piastre modificate con cloramfenicolo. piastre di agar-destrosio-patata (PDA). Le piastre inoculate sono state incubate a 25°C per 10 giorni al buio. Su tutte le piastre inoculate sono state osservate colonie bianche con miceli piatti e ialini che successivamente hanno sviluppato sulla colonia numerosi sclerozi scuri e sferici in 10 giorni. Colture pure sono state ottenute mediante trasferimento della punta ifale su PDA, incubate per 10 giorni a 25°C al buio ed esaminate per le caratteristiche morfologiche. Dopo la colorazione con colorante lattofenolo di cotone utilizzando la tecnica del vetrino pulito, sono stati osservati numerosi conidi piccoli, leggermente ristretti e unicellulari con una lunghezza e larghezza media (n = 50) rispettivamente di 11.0 e 3.6 μm.

La patogenicità di uno dei tre isolati (P200) è stata confermata su sei steli e tuberi di patata di 90 giorni. I tuberi di patata sani sono stati inizialmente sterilizzati in superficie mediante immersione in ipoclorito di sodio al 2% per due minuti, sciacquati due volte in acqua distillata sterile e lasciati asciugare in carta velina sterilizzata prima di seminare individualmente sacchetti di plastica (2 litri). Dopo 45 giorni, le piante di patate sono state annaffiate con 50 ml di una sospensione conidica (10⁶ conidi/ml) dell'isolato P200 vicino alla regione del colletto. Piante di patate non inoculate sono servite da controllo e sono state annaffiate con acqua distillata sterile. Dopo 90 giorni, gli esami visivi hanno rivelato la comparsa di punti neri sulle parti inferiori degli steli, vicino alla superficie del suolo. I tuberi raccolti presentavano macchie grigie con minuscoli sclerozi sulla superficie della buccia. Le piante di patata di controllo non hanno mostrato alcun sintomo né sugli steli né sui tuberi raccolti. Gli isolati originali sono stati recuperati dai tuberi inoculati, soddisfacendo così i postulati di Koch. L'esperimento è stato ripetuto tre volte con gli stessi risultati.

Il DNA è stato estratto da colture di 10 giorni dei tre isolati utilizzando il protocollo CTAB. L'amplificazione e il sequenziamento della PCR sono stati eseguiti con coppie di primer ITS5/ITS4 e GDF/GDR per le regioni dello spaziatore trascritto interno (ITS) e della gliceraldeide 3-fosfato deidrogenasi, rispettivamente. Le ricerche BLASTn sono state effettuate con le sequenze di ciascun isolato, P86 (ITS: GenBank Accession No. OR145915; GADPH: OR232172), P136 (ITS: OR145916; GADPH: OR232173) e P200 (ITS: OR145917; GADPH: OR232174). Tutte le sequenze avevano un'identità dal 99% al 100% con oltre 100 Colletotrichum coccodes isolati, ad esempio identità al 100% con l'isolato BBA 70879 (MT221566.1) per ITS e identità al 99.66% con l'isolato CBS 112987 (JX546735) per GADPH .

Per quanto ne sappiamo, questa è la prima segnalazione di punto nero sulla patata causato da C. coccodi a Mauritius. I risultati di questo studio contribuiranno ad aumentare la consapevolezza di questo agente e ad assistere gli addetti alla divulgazione agricola durante la sorveglianza delle malattie nei campi di patate.

Riferimento: Takoree, SD, Neetoo, H. & Ranghoo-Sanmukhiya, VM (2023) Primo rapporto di Colletotrichum coccodes causando punti neri sulle patate a Mauritius. Nuovi rapporti sulle malattie, 48, e12224. https://doi.org/10.1002/ndr2.12224